Cy3/Cy5/Cy7荧光葡聚糖定制合成

Sur-Release公司，根据葡聚糖分子量、染料种类及标记需求设计偶联方案，实现Cy3-Dextran、Cy5-Dextran、Cy7-Dextran等荧光葡聚糖制备。可对标记比例、分子量及交付规格进行调整，并提供纯化及UV-Vis、荧光光谱等基础表征，满足细胞示踪、材料分布及荧光成像等科研需求。

图1｜Cy3/Cy5/Cy7荧光葡聚糖定制合成

◆ 一、多糖功能化改性（前置活化工艺）

温和羟基活化：针对葡聚糖羟基反应活性较弱的问题，采用温和可控的活化方式，提高后续偶联反应效率。

氨基官能团引入：在葡聚糖骨架上引入活性氨基，为Cy3、Cy5、Cy7等花菁染料共价连接提供反应位点。

活化密度可调：根据目标荧光标记度调节官能团引入比例，兼顾染料偶联量与葡聚糖结构完整性。

低温避光反应：活化及后续处理采用低温、避光条件，减少多糖骨架及荧光基团受到不利影响。

缓冲体系控制：选用适宜的弱酸碱缓冲体系控制反应环境，降低糖苷键断裂及分子量变化风险。

保持原有性质：控制修饰程度，尽可能保留葡聚糖良好的水溶性、分散性及原有理化特性。

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◆ 二、原料选择（定制基础）

所有核心原料均甄选高纯度、低降解、分子量均一的科研级原料，从源头保障定制产品稳定性，支持全参数按需选型：

✦ 2.1葡聚糖骨架原料

选用天然右旋葡聚糖，批次稳定、内毒素低、无杂质多糖污染，支持全分子量梯度定制：4kDa、10kDa、20kDa、40kDa、70kDa、150kDa、500kDa、2000kDa，同时支持客户指定特殊非标分子量定制。

除普通葡聚糖外，可拓展改性骨架：羧甲基葡聚糖（CM-Dextran）、阳离子DEAE-葡聚糖，满足带电、靶向、渗透差异化实验需求。

✦ 2.2花菁染料原料

提供两大系列染料可选，适配不同实验体系，全程可自由定制：

普通Cy系列：Cy3、Cy5、Cy7，纯度≥98%，性价比高，适配有机相兼容体系实验

磺化Sulfo-Cy系列：Sulfo-Cy3、Sulfo-Cy5、Sulfo-Cy7，高水溶性、无细胞毒性、无需有机溶剂助溶，是活体实验、细胞实验、无菌体系首选

各染料固定光学参数，成像信号稳定无偏移：Sulfo-Cy3(555nm/570nm)、Sulfo-Cy5(646nm/662nm)、Sulfo-Cy7(750nm/773nm)。

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◆ 三、标记取代度精准控制（定制核心优势）

标记取代度（DS）是荧光葡聚糖定制的核心参数，直接决定产品水溶性、荧光强度、体内外实验效果，本司支持0.002-0.015全区间精准调控，按需定制专属取代度。

取代度选型指导（科研通用标准）

低取代度（0.002-0.004）：较大程度保留葡聚糖原始性质，无空间位阻、无电荷改变，适配血管通透性、血脑屏障渗透、体内长循环示踪实验

中取代度（0.004-0.008，常规推荐）：荧光强度适中、背景低、信噪比高，适配细胞内吞、共聚焦成像、体外释放定量实验

高取代度（0.008-0.015）：荧光信号强，适配低浓度样品检测、微量成像、长时间动态追踪实验

全程通过投料比精准控参，杜绝标记不均、局部高标记、游离染料残留等问题，每批次取代度误差控制在±0.001以内，批次一致性最高。

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◆ 四、花菁染料共价偶联（核心合成步骤）

NHS酯偶联工艺：采用花菁NHS活化酯与氨基化葡聚糖进行共价偶联，形成稳定的酰胺键连接结构。

定向共价结合：染料分子与葡聚糖活性氨基位点发生反应，减少单纯物理吸附造成的染料脱落。

反应条件可控：在避光、适宜温度及pH 7.5–8.5缓冲体系中完成偶联，控制反应环境稳定。

投料比例可调：根据目标标记度调节染料与葡聚糖的投料摩尔比、体系浓度及反应时间。

温和反应体系：避免高温、高压及强腐蚀性条件，降低葡聚糖骨架发生降解或结构变化的风险。

保持荧光特性：通过避光及温和偶联条件减少花菁染料荧光性能损失，提高Cy3/Cy5/Cy7标记产物的信号稳定性。

图3｜花菁染料共价偶联（核心合成步骤）

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◆ 五、全套质控表征（可溯源交付）

所有定制产品均完成全套理化与荧光表征，每单附带完整检测报告，数据可溯源、可用于论文附图及实验存档：

紫外-可见光谱检测：精准计算染料标记取代度DS，确认标记效率

荧光光谱检测：验证激发/发射波长、荧光强度，保障成像信号稳定

GPC凝胶渗透色谱：检测多糖分子量、分散系数PDI，确认无降解、分子量均一

纯度检测：游离染料残留、杂质含量、水溶性、无菌性检测

交付资料：COA质检报告、原始光谱图谱、GPC数据、MSDS安全说明书

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◆ 六、多级纯化工艺（除杂提质）

合成粗产物含有未反应游离染料、残留活化试剂、小分子杂质，采用双重多级纯化体系，彻底去除杂质，保障产品纯度与实验安全性：

梯度透析纯化：根据葡聚糖分子量匹配对应截留分子量（MWCO）透析袋，持续梯度透析，去除小分子游离染料与无机盐杂质

凝胶过滤层析精制：采用Sephadex G-25凝胶柱二次纯化，精准分离荧光标记多糖与残留游离染料

纯化后严格检测：游离染料残留量＜1%，无小分子杂质、无多糖降解片段，抗终经无菌过滤、低温冷冻干燥，得到高纯固体粉末成品。

图4｜多级纯化工艺（除杂提质）

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◆ 七、产品定制规格参数

✦ 7.1可定制核心参数

葡聚糖分子量：4k/10k/20k/40k/70k/150k/500k/2000kDa（非标分子量可定制）

染料类型：Cy3/Cy5/Cy7、Sulfo-Cy3/Sulfo-Cy5/Sulfo-Cy7

标记取代度DS：0.002-0.015（按需精准设定）

修饰类型：单荧光标记、双标记（荧光+生物素/氨基/巯基等）

✦ 7.2产品基础规格

产品形态：纯色冻干粉末（避光真空封装）

纯度：≥95%，游离染料残留＜1%

溶解性：磺化款纯水/PBS全溶；普通款可水溶，微量DMSO助溶

包装规格：10mg/25mg/50mg/100mg/1g（大小批量均可定制）

交付周期：常规2-3周，加急订单可优先排单

✦ 7.3储存条件

-20℃干燥、避光、密封冷冻保存，避免反复冻融；水溶液现配现用，全程避光操作，保障荧光活性稳定。

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◆ 八、定制科研案例

案例1：高稳定Cy7-Dextran 150kDa水凝胶长效示踪定制

客户需求：温敏水凝胶载体示踪，需体外释放动力学检测+体内皮下植入长效成像追踪，要求荧光光稳定性强、可连续观测14天以上。

定制方案：150kDa高分子量葡聚糖，近红外Cy7染料，定制适配凝胶体系的取代度DS=0.006，强化纯化工艺提升产品稳定性。

图5｜案例1：高稳定Cy7-Dextran 150kDa水凝胶长效示踪定制

案例2：双功能定制Biotin-Sulfo-Cy5-Dextran 20kDa

客户需求：单一多糖同时具备荧光示踪与生物素亲和捕获功能，适配流式细胞术、共聚焦成像、亲和富集多维度实验。

定制方案：20kDa葡聚糖骨架，分步可控偶联生物素与Sulfo-Cy5染料，分别精准调控双修饰取代度，避免过度修饰破坏多糖结构。

图6｜案例2：双功能定制Biotin-Sulfo-Cy5-Dextran 20kDa

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◆ 九、衍生定制产品推荐

基于核心花菁标记合成工艺，可拓展全系列荧光/功能化葡聚糖定制产品，满足一站式实验需求：

经典荧光标记：FITC-Dextran、TRITC-Dextran

进阶花菁标记：Cy3.5/Cy5.5/Cy7.5-Dextran

功能改性葡聚糖：氨基/巯基/羧基葡聚糖、生物素标记葡聚糖

改性骨架标记：Cy系列染料标记CM-Dextran、DEAE-Dextran

服务备注：所有产品仅用于科学研究，不可直接用于人体临床与体内治疗；支持个性化工艺调整、参数定制、数据优化，全程提供技术咨询与售后指导。

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◆ 十、核心应用场景

依托定制化的结构与荧光特性，广泛适配生物医学、材料科学、药剂学等多领域科研实验：

生物屏障研究：血管通透性、血脑屏障、肠道屏障体外渗透模型实验

细胞生物学：细胞内吞、胞内转运、溶酶体定位、大分子摄取机制研究

活体成像：小动物近红外荧光成像、体内分布、循环半衰期、肿瘤靶向示踪

材料药剂学：水凝胶、纳米载体、微球的体外释放、体内降解动态追踪

药物载体研究：多糖基给药系统的示踪、定量、药效机制验证