基于还原端反应的寡糖荧光探针定制开发

Sur-Release公司，支持葡萄糖、半乳糖、甘露糖、低聚糖、糖链片段等多类型寡糖的荧光修饰。可根据实验需求选择FITC、Cy系列、TAMRA、荧光素等标记基团，实现还原端定点偶联。服务涵盖标记方案设计、反应条件优化、纯化及结构表征，满足糖组学分析、生物识别及荧光示踪研究需求。

✦ 核心科研痛点 ｜Sur-Release公司还原端定点标记解决方案

✦ 寡糖 / N - 糖 / O - 糖无天然荧光，无法直接荧光检测 ｜ 还原胺化定点标记，仅糖链还原端单点共价偶联荧光团，赋予稳定可检测荧光

✦ 常规随机标记破坏糖链骨架与生物活性，干扰色谱 / 质谱解析 ｜ 仅靶向还原端醛基反应，不修饰糖链中间羟基，最大程度保留天然结构与识别活性

✦ 标记条件剧烈，造成唾液酸、岩藻糖降解丢失 ｜ 温和低损伤反应体系，最大程度保留特殊糖基完整性，无降解风险

✦ 标记效率不稳，游离染料难去除，干扰后续实验 ｜ 成熟工艺保障标记效率≥80%，配套纯化方案，游离染料残留＜2%，无检测干扰

科研关键点

技术原理：还原胺化（Reductive Amination）

图2｜技术原理：还原胺化（Reductive Amination）

寡糖还原端发生环-链互变，开环产生醛基；酸性条件下醛基与氨基型荧光探针生成席夫碱，经还原剂（氰基硼氢化钠 / 2-甲基吡啶硼烷）还原，生成稳定仲胺键，仅还原端单点标记，糖链中间羟基不参与反应，适合带游离还原端的寡糖、酶解释放N-糖、O-糖链，唾液酸损失较低。

可选荧光标记染料（按应用场景）

拓展方案：还原端先氨基化，再偶联NHS-Cy7.5、ICG等近红外染料，适配活体深度成像。

✦ 染料 ｜ 激发 / 发射 ｜ 适用场景

✦ 2-AB（2-氨基苯甲酰胺） ｜330nm /420nm｜ 糖组学HPLC、CE-LIF色谱分析，糖谱定量，主流糖分析标记

✦ 2-AA（2-氨基苯甲酸） ｜320nm /420nm｜ 毛细管电泳，带电标记，适合低丰度寡糖分析

✦ FITC-EDA｜495nm /525nm｜ 细胞水平结合、凝集素孵育实验

✦ Cy3-EDA｜550nm /570nm｜ 共聚焦荧光显微镜，体外互作成像

✦ Cy5-EDA / Cy5.5-EDA｜650nm /670nm；675nm/695nm｜ 体外 + 小动物活体成像，近红外检测

✦ BODIPY系列 ｜488/510、590/620nm｜ 高量子产率，耐光漂白

定制服务流程

还原胺化标记反应：优化pH、温度、反应时长，选用低损伤还原剂，保护唾液酸 / 岩藻糖不降解；

方案评估：客户提供寡糖样品（干粉 / 水溶液），告知寡糖结构、分子量、是否含唾液酸，确定染料、样品量、目标标记效率；

全套质控表征：

纯化除杂：固相萃取SPE、凝胶过滤GPC，彻底去除未反应游离染料、盐离子；

MALDI-TOF-MS：分子量验证，确认单点标记；

HPLC：标记产物纯度≥90%，游离染料残留＜2%；

可提供 ¹H-NMR辅助结构确认；

UV-Vis：计算标记摩尔比；

产物交付：冻干粉末 / 水溶液，附带COA检测报告，7-15个工作日交付。

案例1：硫酸化壳寡糖Cy5.5还原端标记（活体预实验）

定制真实科研案例

定制需求：还原端定点标记Cy5.5，用于小动物活体荧光示踪，考察寡糖体内分布

客户底物：硫酸化壳六糖，500nmol

解决方案：优化缓冲体系，还原胺化标记，脱盐纯化，去除小分子盐与游离染料

技术难点：底物带大量硫酸基团，反应条件易造成糖链降解；需要兼顾标记效率与产物水溶性

案例2：O-糖链2-AA标记，毛细管电泳CE-LIF检测

图3｜案例1：硫酸化壳寡糖Cy5.5还原端标记（活体预实验）

定制需求：2-AA还原端标记，适配CE-LIF电泳分离检测

客户底物：黏蛋白酶解获得混合O-糖，200nmol

图4｜案例2：O-糖链2-AA标记，毛细管电泳CE-LIF检测

解决方案：还原胺化标记，固相萃取纯化

交付规格与样品要求

产物规格：nmol-μmol级冻干品，溶于水 / PBS；

客户提供样品：最低投入50nmol-1 μmol寡糖，建议干粉较佳；水溶液需除Tris、含伯胺类杂质（伯胺会竞争消耗染料）；

适配实验：HPLC-FLD、毛细管电泳CE-LIF、MALDI质谱、凝集素芯片、细胞结合、小动物荧光成像。

标记效率：常规≥80-90%（受寡糖结构影响）；

可承接底物类型

生物来源糖链：酶解释放N-糖、O-糖；

合成寡糖：葡寡糖、甘露寡糖、壳寡糖、半乳寡糖等；

中性寡糖、含唾液酸酸性寡糖、硫酸化寡糖。

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